粗脂肪含量是糧食 、 油料、 飼料等產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中重要質(zhì)量 指標(biāo) , 是評價產(chǎn)品品質(zhì) , 組織生產(chǎn)的重要依據(jù)之一。 國內(nèi)外 測定粗脂肪含量方法有十余種之多 , 索氏抽提法是自前應(yīng)用 最廣泛測定方法 , 是公認的脂肪含量測定的經(jīng)典方法。 在實 際工作中, 此法存在的問題主要是抽提時間過長和抽提結(jié)束 后抽提瓶不易恒重。 圍繞這些問題 , 對抽提過程和抽提前后 采用的處理手段進行改進 , 以國標(biāo)方法為參照 , 熱浸提一油 重法和殘余法為改進方法 , 對照 比較這三種檢測方法的測定 結(jié)果。 1 方法原理 經(jīng)典索氏提取法測定脂肪是將樣品放在抽提筒內(nèi) , 以 水浴蒸餾冷凝的乙醚進行回流浸提 , 一般要十幾小時。 熱 浸提一油重法 由于樣品處于高溫溶劑中 , 分子運 動加快 , 使 脂肪浸出速度加快 , 因而大大地縮短浸提時間 , 從而加快測 定速度 , 一般完成樣品的整個提取過程不到 2 小時。 鋁杯 代替玻璃瓶 , 電熱板代替水浴加熱, 抽提杯容易恒重 , 而且 抽提杯不易被污染 , 操作簡單容易。 殘余法不 同之處在于 采用抽 提過脂肪的殘余物質(zhì)量計算脂肪含量 , 較以前的殘 渣法改進之處在于不需恒重紙袋質(zhì)量 , 在電子天 平上稱出 試樣質(zhì)量 , 抽提前后 樣品質(zhì)量差為浸 出脂肪量。 測得結(jié)果 為原 樣脂肪含量 , 不是干基脂肪含量 , 與國標(biāo)法測得結(jié)果 一 致。

2 檢測方法 .2 1 試劑 分析純無水乙醚或沸程為 3 0 ` 6 0 石油醚。

2.2 儀器 索氏脂肪提取器 ; F 0 s S 2 05 5 型脂肪測定儀 ; 電子天平

2.3 式樣制備 選取具有代表性樣品 20 0 9, 粉碎后全部通過 6 0 目篩 , 裝于密封容器中 , 防止試樣成分變化。

2.4 分析步驟

2 .4 1 國標(biāo)法 按 G B / T 5 5 1 2 食品中脂肪測定方法或 G B / T 643 3 飼料

粗脂肪測定方法進行檢測。 為使抽提終點有一量化概念 , 消 除不同人員目測產(chǎn)生差異 , 同時避免檢查抽提終點時乙醚大 量揮發(fā)損害檢驗人員健康。 采取同時平行測定 6 個樣品 8 小時后取出一個抽提瓶 , 以后每隔2 小時取出一個 , 直到樣 品脂肪含量不再增加為止。 測出不同類別樣品需要的抽提 時間 , 可作為日常工作參照 , 也是改進法實驗條件確定依據(jù) 之一。 部分樣品測定脂肪需要的抽提時間見表 1。

2 .4 2 熱浸提一油 重法 稱樣 l 一 5 9 (M ) 于濾紙筒中 ,烘干 , 把濾紙筒放到脂肪測 定儀中。 鋁杯在 10 5 ℃士 2℃條件下恒重 (M )I , 放到儀器加熱 板上 , 壓下儀器連接手柄, 使鋁杯與回流器緊密連接 , 從加液孔加入 乙醚 8 0 m l, 接通冷凝水。 視脂肪含量設(shè)定儀器條件為: 加 熱溫 度 1 3 5℃ , 時 間: 浸提 3 0 面n 一 9 0 m in , 淋 洗

3 0 im n , 試劑回收 1 0 m i n , 蒸干 5 m io n 取下鋁杯 , 1 0 5℃士 2℃ 烘箱中干燥 3 0 而n , 在干燥器中冷卻 , 稱重 (M o z ) 脂肪含量 =( M2 一 M ,) X 100 /M. 2 .4 3 殘渣法 稱 取式樣 2 9 (M ) (準(zhǔn) 確至·. 0 0 00 2 9 ), 用 濾紙 包好 ,1 0 5℃ 士 2℃烘箱中干燥 3 h 取出 , 在干燥器中冷卻 , 稱重(M ) I。 將樣包裝入索氏脂肪抽提器抽提筒中 , 再倒入無水乙 醚 , 乙醚高度為完全浸泡樣包 , 連接好儀器各部分 , 浸泡至少1 6 h。 將浸泡后無水乙醚放入抽提瓶中 , 在抽提瓶中放入兒 粒玻璃球 , 然后 , 抽提筒 中重新倒入無水乙醚使之完全浸泡樣 包 , 連接好儀器各部分 , 接通冷凝水 , 在 6 0 ℃ 一 7 5 ℃ 水浴上加 熱, 使乙醚回流, 控制乙醚回流次數(shù)為每小時 8 次。 一般抽提 6 h 一s h。 抽提完畢 , 取出樣包 , 置樣包于通風(fēng)處使乙醚揮 發(fā)。 將樣包放入 10 5 ℃士 2℃ 烘箱中干燥 Z h , 取 出, 在干燥器 中冷卻 , 稱重 (M Z)。 脂肪含量 = (M l一 M勻X l oo / M 3 結(jié)果分析

1 ) 樣品選取脂肪含量 高的花生、 脂肪含量中等的魚粉 和脂肪含量較低的玉米 , 采用熱浸提一油重法和殘渣法分別 測定 , 結(jié)果重 復(fù)性見表 2。 從表 2 數(shù)據(jù)看出 , 兩種測定方法 重現(xiàn)性都較好。

2 ) 選取一組樣品分別用三種方法測定樣品脂肪含量 , 取 5 次測定結(jié)果平均值為最終結(jié)果進行比較 , 數(shù)據(jù)見表 o 3 兩種測定結(jié)果與國標(biāo)法相比, 無顯著性差異 (P > . 0 0 5 ) 。

(3 ) 為確定兩種檢測方法的有效性和可比性 , 與其它實 驗室測定結(jié)果進行比較 , 結(jié)果見表 4 o 絕對差均小于 .0 5% , 相對偏 差 最高為 3 . 6% , 符合標(biāo)準(zhǔn) G B / T 6 4 3 3 一 19 9 4 、 G B / T55 1 2 8 5 不同實驗室 間重復(fù)性要求。

4 結(jié)論

( 1 ) 國標(biāo)法、 熱浸提一油重法和殘余法均具有良好重現(xiàn) 性和準(zhǔn)確度 , 說明兩種改進方法測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠 , 一 定條 件下 三種方法可以相互代替使用。

( 2 ) 熱浸提一油重法優(yōu)勢在于利用脂肪測定儀使試樣 浸入沸騰的溶劑中 , 使脂肪迅速進入溶劑中。 所以樣品不 同

只 需改變浸提時間 , 淋洗時間改變沒有浸提時間改變影響 大。 3 0 m i n 淋洗時間足以使脂肪完全洗脫。

( 3 ) 殘余法浸泡時間可 利用 晚上 時間, 由于不 加熱 回 流 , 不必守護 , 不占用工作日。 回流時間可參照表 1 進行調(diào)

整。 外加的脂肪如方便面等油炸食品 , 雖 含量高 , 但脂肪容 易浸出 , 浸泡后回流 2 一3 小時即可提取完全。

( 4 ) 實驗過程中應(yīng)注意稱量 的重要性 , 天平室環(huán)境條件 除滿足一 般要求外 , 相對濕度應(yīng)控制 在 4 5 % 以下。 在此條 件下濾紙包烘 2 小時即達到恒重要求 , 不必復(fù)烘。 鋁杯在整個抽提過程一 直處于 13 5 ℃環(huán)境中 , 只需烘 3 0 m i n 即達到 恒重要求。 與國際法相比 , 節(jié)約恒重所需大量時 間, 簡化實 驗操作 。

(5 ) 脂肪測定儀 同時可測定 6 個試樣 , 在 1 個工作 日內(nèi) 可 完成檢測 , 實現(xiàn)脂肪快速、 準(zhǔn)確測定。 能滿足 日常生產(chǎn)和 商貿(mào)交易 中對脂肪含量測定要求。 殘余法在一 套提取器 內(nèi) 可 同時放置多個濾紙包 , 同時測定多個樣品 , 顯著提高工作 效率 , 節(jié)省水、 電和試劑。 殘余法對大批量樣品脂肪檢測更 能顯現(xiàn)其優(yōu)越性 , 如糧食、 油料品種篩選 , 市場商品質(zhì)量普查 等工作中脂肪含量測定。

( 6 ) 國標(biāo)法盡管費時間 , 但仍是普遍使用方法。 三種方 法相互驗證起到日常檢測質(zhì)量的控制作用。 脂肪檢驗要求 認真細致 , 一旦忽視某個細節(jié) , 都會造成實驗失敗。